Tesztorganizmus neve | |
Latin név | Pseudokirchneriella subcapitata |
Magyar név |
|
Angol név |
|
Rendszertani besorolás | |
- ország | Plantae, növények [2] |
- törzs | Chlorophyta, zöld alga [2] |
- osztály | Chlorophyceae [2] |
- rend | Chlorococcales [2] |
- család | Chlorellaceae [2] |
- nemzetség/nem | Pseudokirchneriella/Selenastrum [2] |
- faj | Pseudokirchneriella subcapitata [2] |
Tesztorganizmus jellemzői | |
Élőhely | édesvízi tavak, folyók [3] |
Fontosabb külső jegyek | hajlított és csavart megjelenésű olyan, mint a sarló. A teljes hossza általában 8-14 μm és szélessége 2-3 μm közötti. [4] |
Táplálkozás | fotoszintézis [5] |
Szaporodás | ivartalan, spórával [5] |
Egyéb fontosabb jellemzők | egysejtű édes vizi alga [1] |
Szabványok és referenciák | |
Szabványosított tesztmódszer? | Igen |
Szabvány típusa, száma | ISO 8692:2004 [6] MSZ EN ISO 8692:2005 [7] OECD 201 [8] |
Nem szabványos tesztmódszerek |
|
Környezettoxikológiai alkalmazás | |
Tesztorganizmus fenntartása | Tápagaron, tápsóoldatban [9] Az alga növekedéséhez 10:14 órás sötét: világos ciklus (megvilágítás paraméterei: fényerősség: 0,72x1020 foton/m2s ± 20 %, 8000 lux, spektrum:400-700 nm, színhımérséklet 4200K), 23±2°C hőmérséklet és pH= 8,1±0,2 szükséges.[9] |
Teszteléshez használt organizmus jellemzői | Egysejtű, édesvízi algafaj. Az algaszuszpenzió kiindulási sejtszáma 5*103-1*104 db sejt/ml-nek kell lennie.[6] Az algáknak az exponenciális növekedési fázisban kell lenniük a teszt megkezdésekor. [6] Az inokulum 3 vagy 7 napos törzstenyészet lehet. [6] Egy adott teszten belül használt algáknak megegyező forrásból és törzstenyészetből kell származnia.[6] A teszt megkezdése előtt ellenőrizni kell az algák egészségét mikroszkópos vizsgálattal. [6] |
Tesztorganizmus érzékenysége | Rendszerint bioindikátorként alkalmazzák tápanyagok és toxikus anyagok szintjének mérésére édesvízi környezetben. Rendkívül érzékeny tesztorganizmus a szennyezőanyagok széles skálájára, beleértve a fémeket is. [4] |
Tesztmódszer alkalmassága | Vízben oldható vegyi anyagok; felszíni vizek, talajvizek, szennyvizek toxikológiai vizsgálata.[9] |
Tesztelés elve | Az alga növekedési teszt a toxikus vegyi anyagoknak az elsődleges termelők anyagcsere-folyamataira gyakorolt gátló hatását vizsgálja.[10] |
Tesztmódszer leírása | Minden folyamathoz steril fülkét és edényeket kell használni (autoklávban vagy 150-180°C-ra melegítve). Három 250 ml-es vagy 300 ml-es Erlenmeyer lombik szükséges minden vizsgálathoz. Mindenből 3 párhuzamosat kell mérni, kivéve a kontroll mintát, abból hat párhuzamos mérése szükséges. Minden főzőpohárba 100 ±5 ml teszt oldatot kell bemérni. ( A sejtszám meghatározása és a teszt megkezdése, inokulum hozzáadása között kevesebb, mint négy óra telhet csak el.) A megfelelő algaszuszpenzió kiindulási sejtszáma 5*103-1*104 db sejt/ml. A tesztelés során az algákat levegőztetés nélkül, 23 ±2°C-on és állandó megvilágítás (60-120 μE*m-2s-1, 400-700 nm) mellet kell tartani. A pH értékét a vizsgálat teljes ideje alatt 8,1±0,2 között kell tartani. Kerülni kell, hogy az algasejtek az edényfalára tapadjanak. A teszt indításától számított 24,48 és 72±2 órában határozzuk meg az adott minták sejtszámát, hogy meghatározhassuk a tesztvegyület növekedésre gyakorolt hatását (inhibíció, stimuláció) és összevethessük a kontrollal. Az eredmények alapján határozzuk meg a koncentráció-válasz görbét, és számítsuk ki az adott kezelési időhöz tartozó EC50 értéket. [6]
|
Mérési végpontok | sejtszám/ ml, optikai denzitás értékek, extrahált klorofill-tartalom: EC50 [9] |
Vizsgálati végpontok | szaporodásgátlás: EC50 [9] |
Vizsgálati végpont: irodalmi példák és adatok | EC50 (0-72): 1,19 mg/l±0,27 mg/l [6] |
Méréshez szükséges műszerek | fénymikroszkóp vagy spektrofotométer [9] |
Tesztek időigénye | 72 óra [6] |
Egyéb | |
Megjegyzések |
|
[1.] Algae Resource Database, National Bioresource Project http://www.shigen.nig.ac.jp/algae/strainDetail.jsp
[2] The Taxonomicon: Brands, S.J. (comp.) 1989-present. The Taxonomicon. Universal Taxonomic Services, Zwaag, The Netherlands. - http://taxonomicon.taxonomy.nl/
[3] Algae pseudokirchneriella subcapitata in environmental hazard evaluation of chemicals and synthetic- Villem Aruoja, Tartu, 2011.
http://www.google.hu/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=2&ved=0CCcQ FjAB&url=http%3A%2F%2Fwww.geoeco.ut.ee%2F1090551&ei=2HElVM- zBYOjygPEjYLgCQ&usg=AFQjCNFJredIT830GQ81EGzuerNJQcwmzw
[4] Pseudokirchneriella subcapitata - Wikipedia, the free encyclopedia- http://en.wikipedia.org/wiki/Pseudokirchneriella_subcapitata
[5] Algae Base-Pseudokirchneriella subcapitata (Korshikov) F.Hindák
http://www.algaebase.org/search/species/detail/?species_id=U9d5f17a3f2003c7c&- session=abv4:B03FEA1F16a2a2CFEDRyOPD5B3C3
[6] Water quality - Freshwater algal growth inhibition test with unicellular
green algae - ISO 8692:2004-
http://www.google.hu/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=1&ved=0CB8Q FjAA&url=http%3A%2F%2Fecotoxwasteringtest.uba.de%2Fh14%2Fresources%2FS OP_Algae.pdf&ei=gdomVNXmJ8zXau2JgfAJ&usg=AFQjCNHttvpmfGi_dDf- y9QbYGtfC73C1w
[7] Vízminıség. Édesvízi alga növekedésgátlási tesztje egysejtű zöldalgafajokkal MSZ EN ISO 8692:2005 alapján- http://www.mszt.hu/
[8] OECD 201 Alga teszt, Növekedés gátlási teszt OECD 201- http://www.oecd.org
[9] BME – ABÉT Környezettoxikológia Laboratoriumi gyakorlat-Elméleti bevezetés (Molnár Mónika, Kunglné Nagy Zsuzsanna, Hajdu Csilla, Fekete-Kertész Ildikó 2013.) - http://www.google.hu/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=4&ved=0CDkQ FjAD&url=http%3A%2F%2Fenfo.agt.bme.hu%2Fdrupal%2Fsites%2Fdefault%2Ffile s%2Fk%25C3%25B6rnytox_bevezeto_2_ok.pdf&ei=Ze4mVNm4IYfOaNi4gtAC&us g=AFQjCNHlZuHwpyXceS5UE-yYaRiqwOntaw&bvm=bv.76247554,d.bGQ
[10] Gruiz Katalin, Horváth Beáta, Molnár Mónika (2001): Környezettoxikológia, Vegyi anyagok hatása a környezetre, Műegyetem Kiadó, Budapest