A Gram-színezés alapvető differenciáló festési eljárás. Lényege az, hogy a trifenil-metán típusú szinezékkel festett preparátumot jód oldattal kezelik, majd a képződött jódpararozanilin komplexet megkísérlik alkoholos mosással kivonni a sejtekből. A Gram-negatív szervezetek az alkoholos kezeléssel elszíntelenednek, a Gram-pozitív sejtek színesek maradnak. A Gram jelleg elsősorban a sejtfal felépítésében mutatkozó eltéréseket tükröz, de szerepe van a MG-ribonukleát jelenlétének vagy hiányának is. A sejtek Gram jellege a sejtek korával változhat, ezért a színezést célszerű fiatal tenyészetekkel végezni.
A Gram színezés Hucker szerinti kivitelezésénél a rögzített készítményt 1 percig ammóniumoxalátot tartalmazó kristályibolya oldattal színezzük, majd öblítés után 1 percig lugololdattal kezeljük, újabb öblítés után fél percig alkohollal kezeljük és újabb öblítés után 1 percig szafraninnal kontraszt színezést végzünk. A színezés után a Gram-pozitív sejtek sötét kékes-ibolya színűek, a Gram-negatív sejtek rózsaszín-piros színüek lesznek.