Pseudomonas fluorescens

Tesztorganizmus neve

Latin név

Pseudomonas fluorescens

Magyar név

Angol név

Rendszertani besorolás 

-         ország

Bacteria (Baktérium) [1]

-         törzs

Proteobacteria (Proteobatérium) [1]

-         osztály

Gammaproteobacteria (Gamma-proteobaktérium) [1]

-         rend

Pseudomonadales [1]

-         család

Pseudomonadaceae [1]

-         nemzetség/nem

Pseudomonas [1]

-         faj

Pseudomonas fluorescens

Tesztorganizmus jellemzői 

Élőhely

Rizoszféra (talaj felső rétege, mely érintkezik növények gyökérzetével), filoszféra (növények talaj feletti felülete), víz, ideális hőmérséklet 25 – 30 °C. [2]

Fontosabb külső jegyek

Pálcika alakú, több ostora (flagella) van, melyekkel önálló mozgást végez. Pioverdint nevű zöld színű fluoreszcens pigmentet termel. [3]

Táplálkozás

Obligát aerob. Heterotróf, változatosan és intenzíven táplálkozik. [1]

Szaporodás

Osztódással. [4]

Egyéb fontosabb jellemzők

Gram negatív baktérum. Biofilmet képez, mely védelmi funkcióval bír. [3]

Szabványok és referenciák

Szabványosított tesztmódszer?

Nem

Szabvány típusa, száma

−

Nem szabványos tesztmódszerek

Mono-, di- és tri-klorofenolok toxicitásának mérése vizes oldatban lux génnel jelölt Pseudomonas fluorescens alkalmazásával [6]
Talaj össztoxicitásának, a benne található arzenit biológiai hozzáférhetőségének és higany toxicitásának meghatározása Pseudomonas fluorescens alkalmazásával [7]
Szennyezett talajvíz toxicitásának meghatározása lux génnel jelölt Pseudomonas fluorescens alkalmazásával [8]

Kadmium hatása vizes közegben Pseudomonas fluorescens fajra [9]

Ittrium biokkumulációja Pseudomonas fluorescens-ben [10]

Környezettoxikológiai alkalmazás 

Tesztorganizmus fenntartása

Tárolás fagyasztott állapotban -80 °C-on. [5]

Teszteléshez használt organizmus jellemzői

Pseudomonas fluorescens, Spanish Type Culture Collection (CECT n^o 385, ATCC n^o 13525). [5]

Tesztorganizmus érzékenysége

Csak nehézfémet tartalmazó víz esetén: 1.2 mg/l < EC₂₀ < 65.3 és 6.6 mg/l < EC₅₀ < 188 mg/l (legérzékenyebb higanyra, legkevésbé érzékeny nikkelre a vizsgált hat nehézfém közül).
Nehézfém-tartalmú szennyvíz esetén: 6.7 mg/l < EC₂₀ < 182 és 13.9 mg/l < EC₅₀ < 320 mg/l (legérzékenyebb higanyra, legkevésbé érzékeny nikkelre a vizsgált hat nehézfém közül). [5]

Tesztmódszer alkalmassága

Nehézfémek toxicitásának mérése oldatban: Cr⁶⁺, Cd²⁺, Cu²⁺, Hh²⁺, Ni²⁺, Zn²⁺. [5]

Tesztelés elve

A nehézfém szennyezők toxikusak a Pseudomonas fluorescens fajra nézve. A biológiai aktivitás csökkenése magával hordozza a légzés intenzitásának csökkenését. A elektrontranszport láncban mesterséges végső elektronakceptorként az INT nevű tetrazólium-sót használjuk, mely a redukció eredményeképp oldhatatlan formazánná válik. Ez a vegyület forometriásan mérhető, a szennyezett mintáknak a fényelnyelését viszonyítjuk a kontrolléhoz az INT-formazán színének hullámhosszán. [5]

Tesztmódszer leírása

A vizsgált nehézfémeket sók (Cr⁶⁺ (K₂CrO₄), Cu²⁺ (CuCl2·H2O), Cd²⁺ (CdCl₂), Hg²⁺ (HgCl₂), Ni²⁺ (NiCl₂), Zn²⁺ (ZnCl₂)) formájában adták egyrészt ionmentes vízhez (nehézfém-oldatok), másrészt szennyvízhez.
A P. fluorescens baktériumot mérés előtt 10 órán keresztül inkubálták húslében, enyhe rázogatással, amíg az optikai denzitás 650 nm-en elérte a 0.3 − 0.4 tartományt. A baktériumkultúrából 0.8 ml-hez 0.2 ml szennyezőt adtak, ezt egy órán keresztül inkubálták 30 °C-on, rázatással. 0.1 ml 0.2 %-os INT-t adtak hozzá és egy órán keresztül inkubálták, sötétben, 30 °C-on. Formalinnal fixálták, 2000 g-vel centrifugálták 20 percig és a felúszót dekantálták. A granulátumot 2 ml DMSO-val extrahálták és 15 − 30 másodpercig vortexelték, hogy elválasszák a szilárd fázist. Az extraktumot 20 percig centrifugálták 2000 g-vel és a felúszó fázist mérték spektrofotometriásan. [5]

Mérési végpontok

Fényelnyelés, azaz optikai abszorbancia 460 nm hullámhossznál. [5]

Vizsgálati végpontok

Kontroll mintához viszonyított abszorbancia, melyből EC₂₀ és EC₅₀ értékek számíthatók. [5]

Méréshez szükséges műszerek

Vortex, centrifuga, inkubátor, spektrofotométer

Tesztek időigénye

Akut, 3-4 óra

Egyéb 

Megjegyzések

Mezőgazdaságban növényvédelemre használják, mivel távol tartja a növényi patogén organizmusokat.
Környezetvédelemben talajremediációra használják, mivel bizonyos műanyagokat képes bontani.
Mupirocin nevű antibiotikumot termel, melyet bőr-, szem- és fülfertőzések kezelésér használnak. [3]