A tesztelés során 48 óránként kezelünk minden esetben egy másik tesztállatot a vegyi anyag előre meghatározott dózisával. Az első állat kisebb dózist kap, mint a becsült 50%-os halálozási arányt okozó dózis (LD50 dózis). Ha az állat túléli a kezelést, a következő állat 3,2-es faktorral beszorzott dózisban kapja meg a vegyianyagot. Ha az állat elpusztul, akkor a következő egyed 3,2-es faktorral csökkentett dózist kap.
A kísérletek végén az 50%-os halálozási arányt okozó dózist (LD50) a „legnagyobb valószínűség” statisztikai módszerrel lehet meghatározni.
Ezeknél a teszteknél általban nőstény rágcsálókat használnak, melyek adott előírások szerint vannak tartva és felnevelve ellenőrzött családból.
Bővebben a módszerről angolul olvashat: http://www.oecd.org/dataoecd/17/51/1948378.pdf