SkinEtich teszt

A SkinEthic bőrirritációs tesztet azért alkották meg, hogy a bőrirritatív hatású vegyületek citotoxikus hatásának mérésével bizonyítható legyen a vizsgálandó vegyület irritatív vagy nem irritatív mivolta. A kezelt bőrszövet relatív életképességét mérjük 42 perces kezelés és 42 órás megfigyelési idő után. A mérés végpontja a sejtek életképességének mérése. Ez a mitokondriális dehidrogenáz enzim aktivitáscsökkenésével van öszefüggésben, melyet egy MTT nevű oldattal detektálnak. Az MTT egy sárga színű tetrazólium sóoldat, melyet az imént említett dehidrogenáz enzim kék színűvé képes redukálni. A negatív kontroll életképességének 50%-a határérték, mely alatt és felett nevezzük a vizsgálandó anyagot irritatívnak vagy nem irritatívnak. 

A teszt kivitelezése: a vizsgálandó anyagot 3 szövetlemezkére helyezzük és szobahőmérsékleten 42 percig rajta hagyjuk. Ezután foszfátsó pufferrel mossuk, majd megszárítjuk. Ezután az epidermiszt friss tápközegbe helyezzük, majd 37°C-on 42 óráig inkubáljuk. Ezt követően 0,3 ml MTT 81 mg/ml) oldattal 3 órán keresztül inkubáljuk az epidermisz-lemezkéket. A képződött formazánkristályokat 2 órás 1,5 ml-es izopropanol kezeléssel extraháljuk, majd az oldat optikai denzitását 570 nm-en mérjük.